歐際醫(yī)藥依托擁有實驗動物使用許可證的實驗動物中心進行合作，為您提供主要包括模型制備、受試物給藥、標本采集、功能指標檢測等技術服務。

服務目錄號：#OGF-018

服務項目：輔助保護胃黏膜

服務內(nèi)容：

1.急性胃粘膜損傷無水乙醇模型、急性胃粘膜損傷消炎痛模型、慢性胃潰瘍模型（任選其一）

2.選用SD或Wistar 健康大鼠，單一性別，180－220 克，每組 8－12 只。

3.受試物設三個劑量組，其中一個應為人體推薦量的5 倍劑量組，并同時設置正常對照組。不同的損傷模型，還應設置相應的模型對照組。慢性潰瘍模型應先造模，手術次日再分組。受試樣品給予時間一般為14 —30 天，必要時可以延長至 45 天。

4.結(jié)果判定：數(shù)據(jù)可用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F 值，F(xiàn) 值<F0.05，結(jié)論：

各組均數(shù)間差異無顯著性。F 值≥F0.05，即 P≤0.05，用多個實驗組和對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計。對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。受試物一個或一個以上劑量組與模型對照組比較，急性胃粘膜損傷模型大體觀察評分或大體觀察評分與病理組織學檢查評分顯著降低，慢性胃潰瘍模型的潰瘍面積和/或體積顯著減小，表明胃粘膜損傷明顯改善，可判定該受試樣品動物實驗結(jié)果為陽性。

客戶提供：受試樣品、陽性對照品

歐際提交：詳細研究報告

服務周期：3個月

服務目錄號：#OGF-018-1

模型名稱：急性胃粘膜損傷無水乙醇模型

動物隨機分空白對照組、模型組和受試樣品三個劑量組。各劑量組灌胃樣品30 天后，全部動物嚴格禁食24 小時（不禁水），此期間亦禁止給予受試物。除空白對照外，所有試驗組動物給予無水乙醇1.0mL/只，1 小時后處死動物，暴露完整胃，結(jié)扎幽門，灌注適量 10%福爾馬林溶液，固定 20min，然后沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，展開胃粘膜，在體視解剖顯微鏡下或肉眼下用游標卡尺測量出血點或出血帶的長度和寬度。因?qū)挾人頁p傷的嚴重性遠較長度大，故雙倍積分。其評分標準見表1

觀察指標：各實驗組胃粘膜損傷程度以損傷發(fā)生率（%）、損傷積分指數(shù)和損傷抑制率（%）表示。損傷發(fā)生率（%）=某組出現(xiàn)出血或潰瘍的大鼠數(shù)量／該組大鼠數(shù)量×100%；損傷積分指數(shù) = 組損傷評分總和／組動物數(shù)量；損傷抑制率（%）= (A-B)/A′100%（A、B 分別為模型組與試驗組的損傷積分）。

組織病理學觀察及評分：大體檢查完畢，將每只動物胃粘膜損傷最嚴重的部位切下，固定于10%甲醛溶液，常規(guī)制片，HE 染色，鏡下觀察。注意選擇胃粘膜正橫切面，包括粘膜全層的區(qū)域觀察。評分方法：以充血、出血、粘膜細胞變性壞死在整個粘膜上皮層的累及程度分為5 級。充血權重為 1，出血權重為 2，上

皮細胞變性壞死權重為3，評分標準及病變總積分公式見表 2。

表2 急性胃粘膜損傷組織病理學檢查評分標準

服務目錄號：#OGF-018-2

模型名稱：急性胃粘膜損傷無水乙醇模型

動物隨機分空白對照組、模型組和受試樣品三個劑量組，灌胃給予動物受試物30 天后，禁食不禁水24 小時，模型組和劑量組給予消炎痛 40mg/kg 一次性腹腔注射。5 小時后處死動物，剖腹將胃取出，結(jié)扎幽門和賁門，從十二指腸與幽門部結(jié)合處注入10%甲醛溶液 5 mL，固定 20 分鐘后，沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，展開胃粘膜，用紙吸干，觀察胃粘膜損傷程度。用游標卡尺測量胃出血或潰瘍的最大長度及寬度，以出血或潰瘍的最大長寬徑作為損傷指標評分。消炎痛所致胃粘膜損傷的潰瘍一般較小，肉眼觀查以點狀多見，其評分標準見表3

觀察指標：各實驗組胃粘膜損傷程度以損傷發(fā)生率（%）、損傷指數(shù)和損傷抑制率（%）表示。損傷發(fā)生率（%）= 某組出現(xiàn)出血或潰瘍的大鼠數(shù)量／該組大鼠數(shù)量×100%；損傷指數(shù) = 組損傷評分總和／組動物數(shù)量；損傷抑制率（%）=(A-B)/A′100%（A、B 分別為模型組與試驗組的損傷積分）。

組織病理學觀察及評分：同急性胃粘膜損傷無水乙醇模型。

服務目錄號：#OGF-018-3

模型名稱：慢性胃潰瘍模型

醋酸注射法：將動物禁食不禁水24 小時，乙醚或水合氯醛或戊巴比妥鈉麻醉后，消毒腹部，于劍突下切開腹腔，將胃輕拉出腹腔外，用微量注射器于胃幽門處漿膜下注射20－30mL 的 30%冰醋酸，縫合切口，術后正常喂食和水。第二天將手術后狀態(tài)良好的動物按體重隨機分為模型組和受試樣品三個劑量組。各

劑量組按相應劑量灌胃，連續(xù)14 天。模型組灌胃蒸餾水或溶劑。禁食 24 小時后處死，取出整個胃浸泡于 10%的福爾馬林溶液內(nèi)，浸泡20 分鐘后沿胃大彎剪開，洗凈內(nèi)容物，取腺胃區(qū)展開平鋪于玻璃板上，用紙吸干潰瘍內(nèi)的水分，測量其面積和體積。潰瘍面積和體積測量法：于帶標尺的解剖顯微鏡下計數(shù)潰瘍所占的方格數(shù)，換算成面積。然后用微量注射器將有色墨水注入潰瘍內(nèi)，將潰瘍填滿與周邊平齊，讀取微量注射器上刻度即為潰瘍的體積。1.4.3.3.2 冰醋酸浸漬法：將動物禁食不禁水 24 小時，乙醚、異氟烷、巴比妥鈉或水合氯醛麻醉后實施剖腹手術，消毒腹部，于劍突下切開腹腔，將牛津杯（內(nèi)徑5mm、長 10mm）垂直放置胃體部粘膜上，向管腔加入冰醋酸0.2mL，1.5 分鐘后用棉簽蘸出冰醋酸，縫合手術切口，術后正常喂食和水，第二天將手術后狀態(tài)良好的動物按體重隨機分組、給藥，動物處置和測量等操作同上。